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本文是学习GB-T 33111-2016 达氏鲟. 而整理的学习笔记,分享出来希望更多人受益,如果存在侵权请及时联系我们

1 范围

本标准给出了达氏鲟(Acipenser dabryanus
Dumeril,1868)的主要形态构造特征、生长和繁殖特

性、细胞遗传学特性、生化遗传学特征、检测方法和判定规则。

本标准适用于达氏鲟的种质检测和鉴定。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T 18654.1 养殖鱼类种质检验 第1部分：检验规则

GB/T 18654.2 养殖鱼类种质检验 第2部分：抽样方法

GB/T 18654.3 养殖鱼类种质检验 第3部分：性状测定

GB/T 18654.4 养殖鱼类种质检验 第4部分：年龄与生长的测定

GB/T 18654.6 养殖鱼类种质检验 第6部分：繁殖性能的测定

GB/T 18654.12 养殖鱼类种质检验 第12部分：染色体组型分析

GB/T 18654.13 养殖鱼类种质检验 第13部分：同工酶电泳分析

3 学名与分类

3.1 学名

达氏鲟(Acipenser dabryanus Dumeril,1868)。

3.2 分类

硬骨鱼纲(Osteichthyes)、鲟形目(Acipenseriformes)、鲟科(Acipenseridae)、鲟属(Acipenser)。

4 主要形态构造特征

4.1 外部形态

4.1.1 外形

体延长呈梭状。头较小呈楔形。口下位，横裂状。具触须2对，位于吻部腹面。眼位于头侧上方。
背鳍高，鳍基部长，起点在腹鳍起点后上方；胸鳍长，位于胸部腹侧；腹鳍、臀鳍较短小；尾鳍歪形，上叶长
于下叶。鱼体背部、体侧及腹部具骨板5行。体表骨板以外区域裸露，具颗粒状小突起。背部和体侧上

半部青灰色，下半部白色，腹部黄白色。各鳍青灰色，边缘为灰白色。

达氏鲟的外部形态见图1。

GB/T 33111—2016

style="width:9.92679in;height:1.9668in" />

图 1 达氏鲟的外部形态图

4.1.2 可数性状

4.1.2.1 背鳍式

D.43～59。

4.1.2.2 臀鳍式

A.25～39。

4.1.2.3 骨板数

背骨板数：8块～14块。

侧骨板数：左右各1行，均为26块～41块。

腹骨板数：左右各1行，均为8块～15块。

4.1.2.4 第一鳃弓外侧鳃耙数

19枚～55枚。

4.1.3 可量性状

不同体长组个体的可量性状范围见表1。

表 1 达氏鲟不同体长组可量性状

比率性状

第一组

体长

6.0 cm～16.5 cm

第二组

体长

16.7 cm～45.0 cm

第三组

体长

45.1 cm～73.0 cm

第四组(雄鱼)

体长

73.0 cm～99.0 cm

第五组(雌鱼)

体长

83.0 cm～108.0 cm

变动范围

变动范围

变动范围

变动范围

变动范围

体长/体高

5.05～9.05

5.05～9.92

5.55～7.55

5.05～8.05

4.55～7.55

体长/头长

2.60～3.75

2.90～4.00

3.36～4.30

3.70～4.60

3.70～4.60

体长/尾柄长

10.70～21.80

7.64～24.50

8.00～22.90

6.55～20.55

10.55～18.55

体长/尾柄高

19.50～30.50

11.96～34.86

15.21～29.50

18.55～28.55

22.55～26.55

头长/吻长

1.50～2.20

1.70～2.40

2.00～2.50

1.90～2.90

2.20～3.10

头长/眼径

7.50～14.50

6.75～19.64

11.50～25.50

15.50～25.50

15.50～25.50

尾柄长/尾柄高

1.20～2.30

1.39～3.63

1.20～2.80

1.10～2.80

1.30～1.9

头长/眼间距

2.40～3.80

2.30～3.70

2.80～3.30

2.60～3.10

未测量

GB/T 33111—2016

4.2 内部构造

4.2.1 鳔

鳔一室，前部膨大，两侧略突起，后部变小。有鳔管与食道相通。

4.2.2 消化系统

胃呈"J"形。具7个～8个螺旋瓣。

4.2.3 腹膜

3kg 以下个体腹膜多为白色，3 kg 以上个体腹膜呈褐色或黑褐色。

5 生长和繁殖特性

5.1 生长

不同年龄组的鱼体长和体重实测值见表2。

表 2 达氏鲟(野生群体)各年龄组的体长和体重实测值

年龄

体长范围

cm

体重范围

kg

0+

5～35

0.004～0.55

1+

30～50

0.45～1.0

2+

50～65

0.9～2.0

3+

60～75

1.85～3.5

4+

70～80

3.25～5.0

5+

80～93

5.0～9.0

6+

88～99

8.0～11.0

7+

97～104

9.5～12.5

8+

99～110

12.5～16.0

5.2 繁殖

5.2.1 成熟年龄

雄鱼4龄，雌鱼6龄。

5.2.2 产卵类型

产粘性卵，
一年一次，分为春季(3月～4月)和秋季(11月～12月)两种产卵群体。

5.2.3 繁殖周期

1年～2年。

style="width:0.5933in" />GB/T 33111—2016

5.2.4 怀卵量

绝对怀卵量0.6×10⁵粒～1.3×10⁵粒。

5.2.5 卵子特性

成熟卵子黑色或灰黑色，卵径2.8 mm～3.5 mm。

6 细胞遗传学特性

染色体数：2n=268±; 核型公式：70 m+16 sm+26 st+156±mc,染色体组型见图2。

XX

style="width:0.45328in;height:0.16676in" />

Y X

× XX 8

◆

X%

style="width:0.48002in;height:0.19338in" />

10μm

图 2 达氏鲟染色体组型

7 生化遗传学特征

达氏鲟眼晶状体苹果酸脱氢酶(MDH) 同工酶电泳及扫描图见图3。

GB/T 33111—2016

style="width:7.79996in;height:4.24006in" />MDH5

MDH4

MDH3

MDH2

MDH1

图 3 达氏鲟眼晶状体苹果酸脱氢酶(MDH)
同工酶电泳图和扫描图

8 检测方法

8.1 抽样

按GB/T 18654.2 的规定执行。

8.2 性状测定

按GB/T 18654.3 的规定执行。

8.3 怀卵量测定

按GB/T 18654.6 的规定执行。

8.4 年龄鉴定

以匙骨和胸鳍为年龄鉴定材料。

取匙骨，洗净，晾干保存。匙骨基部黑色带团为第一年轮，外部每一窄带为年轮。

胸鳍年龄测定按 GB/T18654.4 的规定执行。

整个年龄测定以匙骨年轮和胸鳍切片年轮相互补充和纠正。

8.5 染色体检测

接GB/T 18654.12 的规定执行。

8.6 同工酶检测

8.6.1 样品的采集与制备

取眼晶状体，加200 μL 双蒸水在1 mL 匀浆器中冰浴匀浆，匀浆液于4℃、12000
r/min 离心

30 min,取上清液，重复离心至上清液澄清，将上清液保存于一20 ℃冰箱中备用。

8.6.2 制胶

将制备的7.5%聚丙烯酰胺凝胶液(见A.1.2)倒入模板，插好梳子，静置于37℃恒温箱中30
min,

待凝胶聚合后，置于4℃冰箱中备用。

GB/T 33111—2016

8.6.3 点样

吸取20 μL 预先制备的样品与2 μL 加样指示剂混匀，加到点样孔中。

8.6.4 电泳分离

采用垂直电泳，聚丙烯酰胺凝胶浓度为7.5%,电极缓冲液为Tris-甘氨酸(pH8.3)。
在250 V 电压

下电泳3h。 电泳结束后，放入同工酶染色液，37℃恒温染色。

同工酶电泳分析中使用的各种试剂见附录 A。

8.6.5 结果分析

按GB/T 18654.13 的规定执行。

9 判定规则

按GB/T 18654.1 的规定执行。

GB/T 33111—2016

附 录 A

(规范性附录)

同工酶各试剂的配制

A.1 凝胶的制备

A.1.1 凝胶溶液的配制(见表 A.1)

表 A.1 溶液的配方

溶液

配制方法

凝胶缓冲液

称取Tris(NH₂C(CH₂OH)₃)36.3g,蒸馏水溶解，用浓盐酸调pH为8.9,加蒸馏水定容到

100 mL,4℃贮存。

凝胶储液

称取丙烯酰胺(C₃H₃NO)33.3g,N,N'—亚甲基双丙烯酰胺(C,H。N₂O₂)0.9g,蒸馏水溶解并

定容至150 mL。4℃贮存。

AP

称取过硫酸铵((NH₁)₂S₂O₈)1.5g,蒸馏水溶解并定容至100mL,现配现用。

A.1.2 凝胶的制备

采用7 .
5%的丙烯酰胺凝胶对达氏鲟眼晶体的苹果酸脱氢酶进行电泳分离，该凝胶液配方见

表 A.2。

表 A.2 7.5% 凝胶液制备配方

试剂

用量

凝胶缓冲液/mL

25.0

凝胶储液/mL

16.8

AP/mL

2.4

TEMED(四甲基乙二胺，C₆H₁₆N₂)/μL

37.8

蒸馏水/mL

5.8

总体积/mL

50.0

A.2 加样指示剂

0.15%溴酚蓝-50%甘油：称取0.15 g 溴酚蓝溶于50 mL 蒸馏水，再加50 mL
甘油混匀。

A.3 电极缓冲液

母液配置：称取甘氨酸28.80 g 溶于800 mL 蒸馏水，用 Tris 调 pH 至8 .
3,加蒸馏水定容

style="width:3.09333in" />GB/T 33111—2016

电泳时将电极缓冲液母液稀释10倍使用。

A.4 同工酶染色液的配制

先配制染色用各溶液，见表 A.3, 再配制染色液。

表 A.3 染色用溶液配方

溶液

配制方法

溶剂

用量

A

氯化硝基四氮唑蓝(NBT)

 300 mg

辅酶I(NAD)

 500 mg

吩嗪甲酯硫酸盐(PMS)

 20 mg

蒸馏水(H₂O)

 100 mL

B

DL-苹果酸

 2.68 g

碳酸钠(Na₂CO₃)

 2.78 g

蒸馏水(H₂O)

 200 mL

C

0.5 mol/L Tris-HCl染色缓冲液

(pH7.0)

取Tris 60.5g溶于800mL蒸馏水中，用盐酸调节pH至7.0,加蒸馏水定容至

1000 mL

染色液按 A:B:C:H₂O=12:12:25:90 的比例混合均匀。

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